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淀粉與酪蛋白水解試驗
內(nèi)容
目的:判斷菌種是否具水解淀粉與酪蛋白的能力。
原理:
1. α-淀粉水解酵素,可使α-1.4 及α-1.6 縮醛鍵結(jié)水解,實際反應(yīng)機程不完全了解,但可催化α-1.4
葡萄糖鍵結(jié)產(chǎn)生水解作用,能攻擊聚糖鍵任何淀粉顆粒質(zhì)或淀粉黏膠質(zhì)而形成5~9 單位α組
態(tài)混合物。要完全將淀粉顆粒質(zhì)水解,需用寡-1.6 葡萄糖水解酵素(Oligo-1.6-glucosidase)
來作用在淀粉黏膠質(zhì)1.6-側(cè)鍵結(jié)上,于淀粉水解試驗,將1%可溶性淀粉加入營養(yǎng)培養(yǎng)中,
測定時倒入數(shù)滴碘液于形成菌落周圍,1 分鐘后,若正反應(yīng)為無色,負反應(yīng)為深藍色。
2. 將脫脂乳粉混入洋菜中,測定微生物產(chǎn)生酪蛋白水解酵素的能力,測定酪蛋白被水解而使培
養(yǎng)基由乳白色變成澄清的情形。
材料:
菌株:
1. S:(一種酵母菌)E:大腸桿菌 B:枯草桿菌
培養(yǎng)基:starch+NA, skim milk+NA, skim milk+casein+NA, casein+NA
步驟:
1. 2%starch+NA→starch agar(每人一片)→
S、E、B 為standard strain→37℃、24hr
→加碘液→觀察正反應(yīng)無色、負反應(yīng)藍黑色。
2. a.1%skim milk+NA→第一組、第三組(共12 片)。
b.1%skim milk+1%casein+NA→第二組、第四組、第八組(共17 片)。
c.1%casein+NA→第三組、第五組、第六組、第七組(共23 片)!37℃觀察透明』
結(jié)果
1. starch+NA(+碘液)
枯草桿菌含有淀粉酶,能將淀粉分解成小分子葡萄糖,
加入碘液后無法變色,為正反應(yīng)。
而S 酵母菌和大腸桿菌無含淀粉酶,所以無法將淀粉分
解,加入碘液會呈深藍色,為負反應(yīng)。
1. skim milk+NA 2.s im ilk+casein+NA 3.casein+NA
培養(yǎng)基上有大量不溶性分子的酪蛋白在內(nèi),因此酪蛋白的懸濁粒子使牛乳的乳白色呈現(xiàn)于中。當
菌株含有酪蛋白水解酵素,能將酪蛋白分解成勝肽和胺基酸,使培養(yǎng)基上的酪蛋白粒子消失,讓
菌落周圍變成澄清狀
液胞
植物液胞較大,含有大的水分,可儲存養(yǎng)分、廢物及維持
細胞形
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