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基因克隆的材料選擇技術(shù)-分子科研電子
顯微鏡
重組體分子克隆的選擇或篩選。
單個(gè)基因僅占染色體DNA分子總量極其微小的比例,必須經(jīng)過(guò)擴(kuò)增
,才有可能分離到特定含目的基因的DNA片段,因此需要先構(gòu)建基因文
庫(kù)(gene library),或者叫做DNA文庫(kù),它們由來(lái)自染色體基因組DNA的
全部DNA片段組成。
用于基因克隆的DNA材料的來(lái)源,主要是從特定組織提取的染色體
基因組DNA或mRNA反轉(zhuǎn)錄成的eDNA。究竟選用何種DNA材料,取決于所解
決的問(wèn)題的特殊性。如果所研究的目標(biāo)是要弄清楚一種蛋白質(zhì)的氨基酸
順序,則可以根據(jù)克隆的eDNA序列直接推導(dǎo)出來(lái)。如果研究的是控制基
因表達(dá)活動(dòng)的調(diào)控序列,或是在mRNA分子中不存在的某種特定序列,則
應(yīng)該從染色體基因組DNA中獲得。由此可見(jiàn),用于基因克隆的DNA材料選
擇是一個(gè)重要的問(wèn)題,它決定了究竟采用eDNA克隆還是基因組克隆。
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