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本文標題："細菌細胞壁散落在培養(yǎng)基計量圖像生物顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2017-1-20 12:55:05 本站主頁地址：http://m.vndmy.cn
細菌細胞壁散落在培養(yǎng)基計量圖像生物顯微鏡
吸去培養(yǎng)液，使細菌沉淀盡可能干燥。除去上清的簡便方法是用一
次性吸頭與真空相連，用吸頭接觸液面，輕緩抽吸。當液體從管中吸出
時，盡可能使吸頭遠離細菌沉淀，然后繼續(xù)用吸頭吸去附于管壁的液滴
。
堿裂解提取
1．將細菌沉淀重懸于100μL，冰預冷的溶液I中，用旋渦混合器劇
烈振蕩。須使細菌在溶液I中完全分散，為此將兩個微量離心管的底部
互相接觸并置于旋渦混合器上，同時進行振蕩，可使沉淀迅速分散。對
于有些菌株，細菌的細胞壁成分會散落在培養(yǎng)基中，這些成分可能抑制
限制酶的活性，為此將細菌沉淀重懸于0．5mL STE溶液，離心，所得沉
淀再如上所述重懸于100pI，冰預冷的溶液I中。
2．加入200t-L新配制的溶液Ⅱ。蓋緊管口，快速顛倒離心管5次，
以混合內(nèi)容物。應確保離心管的整個內(nèi)表面均與溶液Ⅱ接觸。不要振蕩
，將離心管放置于冰上。
3．加入150tm用冰預冷的溶液Ⅲ。蓋緊管口，將小離心管倒置后溫
和地振蕩10s使溶液Ⅲ在粘稠的細菌裂解物中分散均勻，之后將離心管
置于冰上3～5min。
4．微量離心機于4℃以15000r／rain離心5min，將上清液轉(zhuǎn)移到另
一離心管中。
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