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核糖體RNA含量細(xì)胞內(nèi)酶活力分析圖像
顯微鏡 細(xì)胞膜的完攙性與細(xì)胞的能量狀態(tài)有關(guān),不同方式的物質(zhì)跨膜
運(yùn)動(dòng),其結(jié)果是產(chǎn)生并維持了膜兩側(cè)不同物質(zhì)特定的濃度分布。微
生物膜電位通常由ATP酶的氫離子外排或電子傳遞鏈產(chǎn)生。在理論
上,電位可由親脂的陽(yáng)離子在細(xì)胞和培養(yǎng)基懸浮液間的分布來(lái)確定
。
呼吸作用是活細(xì)菌的基本生命過(guò)程,有無(wú)呼吸活性是細(xì)胞活性
比較可靠的參考標(biāo)準(zhǔn)。四唑鹽類(lèi)在細(xì)胞內(nèi)的還原現(xiàn)已被用來(lái)作為呼
吸活性的指示劑,這類(lèi)化合物可以從呼吸鏈上截取電子,從而使自
身被還原,這個(gè)過(guò)程也證實(shí)了呼吸鏈處于正常的運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)。此類(lèi)化
合物的氧化態(tài)可溶于水,沒(méi)有熒光性。但當(dāng)被還原時(shí),則具有熒光
性,并且不溶于水。
細(xì)胞內(nèi)酶活力
能夠和底物反應(yīng)的酶自然是有活力的。細(xì)胞內(nèi)特殊的、標(biāo)志性酶
的活力通常是細(xì)胞處于代謝活力的指示。在和熒光標(biāo)記的底物反應(yīng)
后,從物質(zhì)熒光性質(zhì)的變化就可以知道酶的活力情況。
核糖體RNA含量
細(xì)胞的生長(zhǎng)速率和活性與核糖體含量有定量關(guān)系。那些與寡核苷
酸探針雜交后呈陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)胞就可被視為有活性的細(xì)胞。合成探
針底物為16S rRNA(為核糖體的構(gòu)成分子),通常由一段合成的DNA
低聚合物,一個(gè)發(fā)色團(tuán)和一個(gè)連接分子構(gòu)成
DNA含量
的細(xì)菌是有活性的,盡管類(lèi)核體的存在不能保障細(xì)菌正在生長(zhǎng)
或有能力生長(zhǎng)。這一標(biāo)準(zhǔn)得到的結(jié)果可能會(huì)給出活性細(xì)菌估計(jì)的最
大值,因?yàn)樘幱谛菝邞B(tài)、饑餓或被病毒感染的細(xì)菌,都存在類(lèi)核體
,他們也會(huì)被計(jì)數(shù)。但如以別的標(biāo)準(zhǔn)判斷活性,他們可能又被認(rèn)為
是非活性的。處在饑餓狀態(tài),沒(méi)有類(lèi)核體的細(xì)菌在提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)后
,可以重新獲得黃色熒光的類(lèi)核體。沒(méi)有類(lèi)核體的細(xì)胞可能仍活著
,只是所含的DNA可能處于一種相對(duì)松散的狀態(tài)或其濃度低于判斷
標(biāo)準(zhǔn)。
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