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本文標題："應(yīng)用光學顯微鏡定過碘酸氧化產(chǎn)生的醛基"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2016-11-14 10:07:10 本站主頁地址：http://m.vndmy.cn
應(yīng)用光學顯微鏡定過碘酸氧化產(chǎn)生的醛基
光學顯微鏡組化中PAs法是靠測定過碘酸氧化產(chǎn)生的醛基，據(jù)認為這
個氧化步驟對相鄰兩碳原子上帶有一對未被取代的游離羥基的糖殘
基也有相當?shù)奶禺愋�。用六亞甲四�?又稱亞甲胺)形成絡(luò)合物的堿
性銀溶液可用來測定醛基�，F(xiàn)已廣泛用于電鏡技術(shù)中染PAS反應(yīng)陽
性的結(jié)構(gòu)。
1．具體操作步驟
(1)一般用多聚甲醛固定組織，用戊二醛固定從理論上講可能
有引進醛基的危險，不能用丙烯醛。有人用四氧化濺后固定再去餓
，但最好不用。
(2)適當緩沖液洗組織，乙醇脫水，環(huán)氧樹脂包埋，超薄切片
。
(3)切片于惰性金屬載網(wǎng)(金網(wǎng)或鎳網(wǎng)等)，用l％過碘酸水溶液
室溫處理20—2Stain。
(4)蒸餾水洗lOminX 3(也可在蒸餾水中過夜)。
(5)用雙蒸水制備下液；A液，3％新鮮制備的六亞甲四胺(hexa
methylenetetμmine)溶液。B液，5％硝酸銀℃液，5％四硼酸鈉。
然后將5mi B液加入到100mi A液中，攪拌，使所生成的沉淀溶解，
再加入12miC液和lOOml雙蒸水配成六亞甲四胺銀溶液。
(6)將切片置六1gi甲四胺銀溶液的液面上，蓋好容器，避光于
60℃烘箱中染40—60min，或等切片顯示出淡棕色為止。
(?)將容器遮蓋好放冰箱，冷卻后再把切片轉(zhuǎn)到蒸餾水表面。
(8)用5％硫代硫酸鈉洗5rain， 用蒸餾水洗2次。干燥后復(fù)染
或不復(fù)染，電鏡觀察。
2．對照
(1)省略第(3)步的過碘酸處理，切片無特異性染色。
(2)第(3)步前還原和烷化蛋白質(zhì)的一SH基，可證明染色特異性
。
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