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檢測細胞的速度-流式細胞儀的基本結構
流式細胞儀的基本結構
流式細胞儀°FCM主要由光源、氣控液流系統(tǒng)、光電檢測及計
算機處理系統(tǒng)、細胞分類純化和自動克隆系統(tǒng)四大部分組成。
(1)光源:光源用激光(氬激光或氪激光),并配有一套光聚焦
裝置,使激光恒定地、準確地投射于單細胞流上。
(2)氣控單細胞層流系統(tǒng):該系統(tǒng)由壓力氮氣瓶、鞘液瓶、濾
器、樣品室、硅化室、流室、噴嘴、吸廢瓶、真空泵及多千可調氣
體控制閥等構成。在氮氣壓力下,鞘液、細胞懸液同時進入流室,
但二者有壓力差,鞘液壓力較低,細胞懸液壓力較高,經(jīng)噴嘴時形
成鞘液包裹細胞懸液的層流,調節(jié)壓力差可改變二者的流量比,以
此控制檢測細胞的速度。細胞層流垂直而下,與激光束交會,產(chǎn)生
散射光和熒光。
(3)光電檢測及計算機信息處理系統(tǒng):該系統(tǒng)由光電倍增管、
示波器、電子計算機、圖象顯示屏等組成。至少有4個光電倍增管
分別檢測前向散射光、90°散射光、綠熒光、紅熒光而形成的FLS
、90°LS、GFL和RFL等參數(shù),這些參數(shù)再作對數(shù)或積分處理。每個
細胞帶1000—3000,t)熒光分子即可產(chǎn)生電脈沖。電子汁算機能實
時處理這些電脈沖信息。由于電子計算機的實時快速分析和調控,
使細胞分類純化和自動測量成為可能。
(4)細胞分類純化和自動克隆系統(tǒng):該系統(tǒng)由高頻壓電晶體、
靜電偏轉板、收集器、細胞恒溫裝置、自動克隆裝置等構成。
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