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本文標(biāo)題："酶反應(yīng)最適溫度一般為37℃-超微結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-11-14 19:46:14 本站主頁地址：http://m.vndmy.cn
酶反應(yīng)最適溫度一般為37℃-超微結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)
孵育液要避免嚴(yán)重的高滲和低滲。配制孵育液時(shí)各物質(zhì)要充分
溶解。否則，各種成分的濃度會(huì)發(fā)生改變。溶解各種成分的順序，
一般按照已定的順序進(jìn)行。孵育反應(yīng)適合于在振蕩式恒溫水浴箱中
進(jìn)行，孵育過程中不斷振蕩，使組織切片反應(yīng)均勻完全，孵育液也
易滲入組織內(nèi)部中。沒有振蕩式恒溫水浴箱時(shí)，在恒溫水浴箱中人
工振蕩孵育液。酶反應(yīng)最適溫度一般為37℃，少數(shù)酶最適反應(yīng)溫度
在20'C或高于37℃。孵育時(shí)間和溫度要根據(jù)不同的酶和組織通過實(shí)
驗(yàn)確定。反應(yīng)結(jié)束后要用配制孵育液的緩沖液或其它合適緩沖液或
生理鹽水等漂洗組織，一般換洗2—3次，每次l一5min(以下簡稱漂
洗)。可在0．05—0．1mol／L二甲胂酸鈉緩沖液中短時(shí)保存(4℃)
。漂洗的目的是去除組織中剩余的各種孵育液試劑，特別是多余的
捕捉劑。一般酶反應(yīng)漂洗后最好及時(shí)進(jìn)行后固定，如那些最終反應(yīng)
產(chǎn)物為俄黑的酶反應(yīng)，若不及時(shí)用織酸處理，反應(yīng)產(chǎn)物會(huì)擴(kuò)散或消
退。少數(shù)酶反應(yīng)：(如鉛法、鈰法等)可在緩沖液內(nèi)保存過夜后再進(jìn)
行后固定。用餓酸后固定之前，對(duì)于那些反應(yīng)前未充分固定(或未
固定)的樣品，可在酶反應(yīng)后用2％戊二醛再固定1h，這時(shí)的固定不
會(huì)影響酶的活性，卻有利于超微結(jié)構(gòu)的保存。
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