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本文標(biāo)題："實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備,即時(shí)觀察培養(yǎng)細(xì)胞倒置式熒光顯微鏡"
新聞來源：未知 發(fā)布時(shí)間：2013-4-6 22:41:16 本站主頁地址：http://m.vndmy.cn
實(shí)驗(yàn)設(shè)備與實(shí)驗(yàn)流程介紹
本實(shí)驗(yàn)室設(shè)置有一細(xì)胞培養(yǎng)室，以方便活細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)也同時(shí)連續(xù)擷
取細(xì)胞生長週期影像。細(xì)胞培養(yǎng)室是供體外培養(yǎng)細(xì)胞之用，主要之配備
有無菌層流操作臺(tái)（Laminar flow hood）及恒溫二氧化碳培養(yǎng)箱（CO2
incubator）。為保持操作臺(tái)之無菌（至少是低污染狀態(tài)），紫外線殺菌燈
及必要之抑菌劑均每日定時(shí)施用。為了能夠即時(shí)觀察培養(yǎng)之細(xì)胞，亦備
有一觀察用之倒立顯微鏡（Inverted microscope，ZEISS Axiovert 200）。
培養(yǎng)室內(nèi)的其他附屬設(shè)備包括二氧化碳鋼瓶、滅菌鍋、水浴槽、….等，
供細(xì)胞培養(yǎng)之必要處理手續(xù)使用。
實(shí)作上我們先將細(xì)胞經(jīng)過靜置培養(yǎng)以后，將細(xì)胞種至材料上，由于
一般細(xì)胞的觀察使用穿透光觀察細(xì)胞，然而材料可能不透光，必須對(duì)細(xì)
胞做螢光染色，接著用影像擷取系統(tǒng)做長時(shí)間的連續(xù)取像，若要在活細(xì)
胞培養(yǎng)系統(tǒng)做長時(shí)間培養(yǎng)，需用活細(xì)胞做 DNA 轉(zhuǎn)殖，產(chǎn)生螢光蛋白來
觀察細(xì)胞在材料上的運(yùn)動(dòng)，但用 DNA 轉(zhuǎn)殖的成本過高，且本研究欲解
決的重點(diǎn)在于分割影像找到細(xì)胞的資訊，故先用免疫螢光化學(xué)染色方法
代替 DNA 轉(zhuǎn)殖，雖然為死細(xì)胞，但影像特性類似，皆感應(yīng)螢光的亮度
反射產(chǎn)生影像，與穿透光產(chǎn)生的相位差影像有別
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