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電子載體可用分光光度的方法來識別-細(xì)胞研究
呼吸鏈中的許多電子載體可用分光光度的方法來識別
呼吸鏈中的許多電子載體可吸收可見光,氧化或還原的時候能
夠改變顏色.每個載體都有各自不同的吸收光譜,可用分光鏡進(jìn)行
簡單的區(qū)分。這樣.盡管不知道它們的確切功能之前,我們還是能
得到純化的載體。
在呼吸鏈上,隨著電子的傳遞,電子載體與電子的結(jié)合力越來
越強(qiáng)(氧化還原電勢越來越高)。我們可以推測,電子載體通過相互
之間的作用逐漸演化出了非常合適的氧化還原電勢。由于鐵硫中心
對電子的親和力較弱,所以它們在呼吸鏈的開始部分占優(yōu)勢,而細(xì)
胞色素具有較高的電子親和力,在鏈的以后階段占優(yōu)勢。
單個的電子載體的排列順序能夠被高分辨率的光鏡檢測出來.
最初分離出的蛋白質(zhì)都按單個多膚去分析,但后來意識到,呼吸鏈
上的蛋白質(zhì)可歸為三大酶復(fù)合體,這樣更有利于理解呼吸鏈上的反
應(yīng)過程。線粒體內(nèi)膜上鑲嵌有呼吸作用三大酶復(fù)合體
由于膜蛋白是疏水的,純化很難,不容易得到完整的蛋白質(zhì),
使用去污劑又會使蛋白質(zhì)變性,破壞了蛋白質(zhì)的天然結(jié)構(gòu)。早在19
60年,人們發(fā)現(xiàn)一些溫和的離子去污劑(如脫氧膽酸)能夠溶解吸納
立體內(nèi)膜上的某些特定的蛋白質(zhì)而使其結(jié)構(gòu)不被破壞。呼吸鏈上的
三個主要的與膜結(jié)合的呼吸酶復(fù)合體通過這種方法就可以提取純化
和鑒定。這些復(fù)合體都可以看成由電子傳遞所驅(qū)動的質(zhì)子泵。
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