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蚊細(xì)胞與哺乳動(dòng)物的細(xì)胞由于物種分子生物學(xué)
近年應(yīng)用分子生物學(xué)方法對(duì)蚊蟲(chóng)進(jìn)行分類研究具有準(zhǔn)確、靈敏
的優(yōu)點(diǎn),是蚊蟲(chóng)分類可靠的方法,但大部分方法都要先連二飛蚊蟲(chóng)
灼基因文庫(kù),然后隊(duì)大量的重組體中篩選,工作量很大,而且具有
一定盲目性。
近年發(fā)展起來(lái)的作為分子遺傳與細(xì)胞遺傳之間橋梁的微細(xì)胞遺
傳學(xué)(microcytogenetics),是染色體顯帶與顯微切割,微克隆技
術(shù)的一門新學(xué)科,在人類遺傳學(xué)中已日益廣泛地應(yīng)用于疾病的診斷
,逆向遺傳學(xué)研究,基因的精細(xì)定位及制圖等方面。
染色體顯帶與顯微切割微克隆技術(shù)的結(jié)合可以建立特定染色體
及亞帶特異性文庫(kù),從而使我們用極少的篩選便可得到理想的克隆
。
具有分類價(jià)值的高度重復(fù)序列DNA分布在異染色質(zhì)區(qū),即C陽(yáng)性
帶區(qū)。rRNA基因則分布在NOR部位,對(duì)比部分進(jìn)行顯微切割、體外
擴(kuò)增和微克隆是獲得理想探針的們便,快速,有效的方法。
蚊細(xì)胞間期PCC技術(shù)的應(yīng)用,提高了染色體的分辨率,方便了
精細(xì)區(qū)帶的切割。同時(shí)顯微切割也可結(jié)合多線染色體進(jìn)行,多線染
色體的膨大區(qū)域有轉(zhuǎn)錄活性,對(duì)某些目的基因的克隆具有良好的應(yīng)
用前景。
蚊細(xì)胞與哺乳動(dòng)物的細(xì)胞由于物種的屏障與細(xì)胞特性造成的多
方面的差異,使融合較為困難。提高兩種細(xì)胞的接觸機(jī)率,使之在
促融劑作用下融合尤為重要。因此合理調(diào)整兩種細(xì)胞的配比,是提
高異相細(xì)胞融合的有效途徑。分裂相的CHO細(xì)胞過(guò)多,引起自身融
合,間期蚊細(xì)胞過(guò)多,則較少見(jiàn)到融合,不同的蚊細(xì)胞由于大小形
態(tài)等方面的差異,所需的配比也不一致,需加以摸索。
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