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本文標題:"滴鏡油,用油鏡觀察菌體的形態(tài)分析圖像顯微鏡"

新聞來源:未知 發(fā)布時間:2017-1-7 20:17:01 本站主頁地址:http://m.vndmy.cn

滴鏡油,用油鏡觀察菌體的形態(tài)分析圖像顯微鏡


細菌染色方法

   革蘭染色法
  (1)玻片菌膜制法:
  ①涂片:取經(jīng)脫脂并干燥(74 mm x 26 mm×1 mm)載玻片一塊,
加適量無菌生理鹽水,取少許菌苔于其中研勻并涂成1 cm×2 cm的
菌膜;液體培養(yǎng)物可直接涂片。
    ②干燥:置室溫或溫箱或火焰上方助其干燥。
    ③固定:將已干的菌膜在火焰上迅速來回通過3次(以不烤焦菌
膜為度),把菌烤死并固定在玻片上。
    (2)革蘭染色方法:向已固定好的菌膜滴加結(jié)晶紫染液染1分鐘
,水洗;加革蘭碘液染≥1分鐘,水洗;用95%乙醇脫色,至菌膜
上無顏色脫下為止,水洗;然后加稀釋石炭酸復紅液染30秒至1分
鐘,水洗,待干。滴鏡油,用油鏡觀察菌體的形態(tài)。
    染色結(jié)果:革蘭陽性菌為紫藍色,革蘭陰性菌為紫紅色。
    (3)注意事項:
    ④涂片不宜過厚,火焰固定時溫度不宜過高。
    ②應定期檢查各種染色液質(zhì)量,以免發(fā)生染色結(jié)果誤差。
    ③染色結(jié)果正確與否,除技術(shù)原因外,與菌齡和溶液pH值關(guān)系
較大。幼齡菌或pH值較高易染成陽性,衰老菌或pH值較低易染成陰
性結(jié)果。
    2.單染色法在工作中,為了節(jié)約時間,對已知的革蘭陽性或
陰性菌,也可直接用一種染液(結(jié)晶紫或復紅)染相應時間后,水洗
、待干,鏡檢的做法。
    3.芽胞染色法
    (1)染色液:
    ①5%孔雀綠溶液。
    ②稀釋石炭酸復紅(革蘭第4染液)。
    (2)玻片菌膜用火焰固定后,用孔雀綠染液(先蓋2層新華1號濾
紙以除雜質(zhì))56℃染30分鐘,水洗;復紅液染1分鐘,水洗;自然干
燥,油鏡鏡檢。
    (3)結(jié)果:芽胞呈紫藍綠色,菌體呈紅色。

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