光學(xué)顯微鏡觀察白色念珠菌形態(tài)!

白色念珠菌(Candida albicans )是絕對(duì)二倍體（obligate diploid）的酵母菌， 在2004年，白色念珠菌mating type locus被發(fā)現(xiàn)與麵包酵母(Saccharomyces cerevisiae)具有相似的性別基因，以二倍體與二倍體交配的方式，產(chǎn)生了擬有性世代，但其有性世代（a/α）仍然不明。本實(shí)驗(yàn)室在2007年，發(fā)現(xiàn)在給與Fluconazole的含有phloxine B 的PDA培養(yǎng)基中C. albicans會(huì)有高頻率的W/O表現(xiàn)型轉(zhuǎn)換。而本研究是為了更進(jìn)一步了解C. albicans遺傳學(xué)變化以及發(fā)生的減數(shù)分裂的可能性，調(diào)查此遺傳的變化是否與抗藥性的機(jī)制有關(guān)，并且利用分子試驗(yàn)的方式去進(jìn)行佐證。初步工作先驗(yàn)證在不同種之Candida在Fluconazole壓力下，是也有相同的轉(zhuǎn)換，而結(jié)果僅有C. tropicalis產(chǎn)生類似現(xiàn)象。而后在四個(gè)C. albicans菌株當(dāng)中(ATCC 14053, BCRC 20512, SJ2S08 and ATCC 22816) 隨機(jī)分離出Opaque菌落（即培養(yǎng)基中的粉紅色菌落）。這些個(gè)別的粉紅色菌落經(jīng)過(guò)第二次的培養(yǎng)分別經(jīng)過(guò)Fluconazole 1、2、3、4週處理，利用聚合酶鏈鎖反應(yīng)分析以及流式細(xì)胞儀分析。于聚合酶鏈鎖反應(yīng)分析中發(fā)現(xiàn)31.25%的菌株至少有一個(gè)MTL基因沒(méi)有被放大出來(lái)。然而這些MTL基因有缺乏的菌落經(jīng)過(guò)1至7周培養(yǎng)，于流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)前期菌株DNA處于單倍體有較高的趨勢(shì)，但培養(yǎng)后期菌株DNA則趨向二倍體。另外，在Fluconazole 至少2週處理下，我們發(fā)現(xiàn)高頻率的類似擔(dān)子細(xì)胞菌落群，利用顯微操作器將四個(gè)子細(xì)胞以及母細(xì)胞分離。聚合酶鏈鎖反應(yīng)分析，第一次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)四個(gè)子細(xì)胞菌落群有一些同型合子（homozygotes）存在，第二次進(jìn)行檢測(cè)則發(fā)現(xiàn)所有的四個(gè)子細(xì)胞菌落群都是異型合子( heterozygotes )。這樣的結(jié)果顯示C. albicans的減數(shù)分裂不是經(jīng)由類似擔(dān)孢子這樣的結(jié)構(gòu)亦或是C. albicans可能是一個(gè)雌雄同株的酵母菌。