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細(xì)菌鐵載體檢測方法需要的設(shè)備和試劑!
設(shè)備
本方法中使用的各種器皿均應(yīng)經(jīng)滅菌處理。
(一)采樣容器:無菌的硼矽玻璃或塑膠容器,亦可使用無菌袋。
(二)稀釋瓶:能耐高溫高壓滅菌之有蓋硼矽玻璃或塑膠制品,但不可以使用棉花塞當(dāng)蓋子。一般有 100 mL 刻度者。
(三)量筒:一般使用 10 mL、25 mL、50 mL 及 100 mL 之量筒。
(四)吸管:一般使用 1 mL、5 mL及 10 mL 之玻璃或無菌塑膠制品,應(yīng)有 0.1 mL 之刻度。
(五)三角錐瓶:硼矽玻璃制品,100 mL、250 mL、500 mL或 1000 mL,可作為混合培養(yǎng)基的容器,且方便儲存者。
(六)試管:大小約 150×15 mm 之試管或有蓋螺旋試管。
(七)培養(yǎng)箱:溫度能保持在 30±1℃ 者。
(八)高壓滅菌釜:用于稀釋液、培養(yǎng)基及不能乾熱滅菌之材料、實(shí)驗(yàn)用具的滅菌。能以 121℃(約 15 lb/in2 或 1 kg/cm2)滅菌 15 分鐘以上者。
(九)乾熱滅菌器:用于玻璃器皿之滅菌。溫度能保持在 160℃、2 小時或 170℃、1 小時以上者。
(十)
顯微鏡:一般光學(xué)顯微鏡,具有10、40、100 倍接物鏡者。
(十一)pH計。
試劑
(一)培養(yǎng)基
1、Leptothrix2xPYG培養(yǎng)基
每一升 Leptothrix 2x PYG 培養(yǎng)基含有下列成分:
蛋白(Peptone)
0.5g
酵母抽出物(Yeast extract)
0.5g
葡萄糖(Glucose)
0.5g
硫酸鎂(MgSO4‧7H2O)
0.6g
氯化鈣(CaCl2‧2H2O)
0.07g
N-﹝2-Hydroxyethyl〕piperazine-N
3.57g
-﹝2-ethane sulfonicacid〕(HEPES)
硫酸錳(Manganese sulfatemono-hydrate)
17.0mg
蒸餾水
1.0L
將 PH 值調(diào)至 7.3,再經(jīng) 121℃,15 分鐘滅菌
(二)稀釋液
1、磷酸二氫鉀溶液
取 3.4 g 磷酸二氫鉀溶于 50 mL 之蒸餾水中,俟完全溶解后,以 1.0 N 氫氧化鈉溶液調(diào)整其 pH 值為 7.2±0.5。然后加蒸餾水至全量為 100 mL,儲存于冰箱中作為原液備用。
2、氯化鎂溶液
取 8.1 g 氯化鎂(MgCl2˙6H2O),先溶于少量蒸餾水中,俟完全溶解后,加蒸餾水至全量為 100 mL,儲存于冰箱中作為原液備用。 使用時分別取 1.25 mL 磷酸二氫鉀溶液及 5.0 mL 氯化鎂溶液混合,再加蒸餾水至全量為 1,000 mL,混搖均勻后,分裝于稀釋瓶中,經(jīng) 121℃ 滅菌 15 分鐘以上,作為稀釋液備用。
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