Affirm VPIII測試，是一種利用分子生物去氧核糖核酸探針技術(shù)(DNA probe)以偵測 檢體中微量致病菌之分析方法(如圖一)。 可以同時偵測出檢體中三種病原菌： Gardnerella vaginalis ； Candida sp. ； Trichomonas vaginalis [7] 。 Affirm VPIII偵測原理乃使用capture probe 與color development probe，兩者在遇到檢體中之Target rRNA時，發(fā)生融合反應(yīng) (hybridization) [8] ，再經(jīng)由連續(xù)沖洗(wash)，以除去游離的探針(free probe)。 此時，加入反 應(yīng)呈色酵素，和color development probe結(jié)合，再加入受質(zhì)，酵素催化受質(zhì)使之反應(yīng)呈色， 藍色判定為陽性反應(yīng)

操作步驟如下： 

1.將陰道拭子檢體放入試管內(nèi)，加入12滴lysis solution，并攪拌均勻蓋子壓緊。 

2.置于85℃加熱器10分鐘。 

3.再加入12滴buffer solution，并攪拌均勻。 

4.將4滴受質(zhì)(substrate solution)加入試劑槽之第七格。 

5.把步驟3之拭子丟棄,更換成過濾頭,將檢體過濾,加入試劑槽之第一格凹槽。 

6.將檢測卡(Probe Analysis Card)置入試劑槽之第一格，由儀器操作，33分鐘后判讀結(jié)果

對照其臨床癥狀，可以發(fā)現(xiàn)確有細菌性陰道炎的病癥；有可能是培養(yǎng) 結(jié)果為多重細菌叢，被其他細菌覆蓋忽略 G. vaginalis的判定。 

檢驗Candida sp.結(jié)果有15

個檢體在顯微鏡檢查中呈陽性，但是在病原菌培養(yǎng)及Affirm VPIII測試皆呈現(xiàn)陰性的結(jié) 果，可能原因為鏡檢人員誤判或病原菌太少。 檢驗 T. vaginalis結(jié)果有1個檢體在顯微鏡檢 查中呈陽性，但是在Affirm VPIII測試中呈現(xiàn)陰性的結(jié)果，追蹤其檢體處理時間，發(fā)現(xiàn)操 作Affirm VPIII測試為采檢后20小時內(nèi)需完成，但已超過其標準時間4小時 [7] ，因而有可 能產(chǎn)生誤差。 比較三種方法結(jié)果，可以得知有其差異性的存在。 G. vaginalis在病原菌培養(yǎng) 的結(jié)果為47﹪，而Affirm VPIII測試中降為40.7﹪，是因為Affirm VPIII測試則必須在菌 量大于2×10 5 CFU/ml以上才會呈現(xiàn)陽性結(jié)果。 同樣情形，Affirm VPIII測試則必須在 Candida sp.菌量大于1×10 4 CFU/ml以上， T. vaginalis菌量大于5×10 3 /ml以上才會呈現(xiàn)陽 性結(jié)果

利用Affirm VPIII在28個檢體檢測出 Candida sp .當以培養(yǎng)法確認時，其中有27個 檢體同時培養(yǎng)出 Candida菌株，我們再進一步鑒定后分別為Candida albicans占62.9% (17/27)； Candida galabrata 37.1% (10/27). 最后評估的結(jié)果，我們認為雖然鏡檢法方便簡單，但僅靠Clue cell來認定 Gardnerella則可能因菌量不足或認 定錯誤，造成 Gardnerella vaginalis偽陽性偏高， 而BD Affirm VPIII對于檢測陰道炎 Candida感染較鏡檢法具有較高敏感性(81.8% vs 66.7%)及特異性(98.8% vs 92.1%)；對于 Candida sp .及 G. vaginalis 的確認亦具較 佳之陽性預(yù)測值，同時解決一般實驗室無法培養(yǎng) Trichomonas的問題 ，唯試劑成本 稍貴(約800元) ，但仍為 臨床診斷提供一個簡單、快速及準確的方法