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本文標(biāo)題："顯微鏡下人工的方法培養(yǎng)細(xì)胞以進(jìn)行病毒的接種"
顯微鏡下人工的方法培養(yǎng)細(xì)胞以進(jìn)行病毒的接種
一、目的
顯微鏡下人工的方法培養(yǎng)細(xì)胞以進(jìn)行病毒的接種
以人工的方法培養(yǎng)細(xì)胞以進(jìn)行病毒的接種或增殖之用
二、原理
病毒不若細(xì)菌可以在人造之培養(yǎng)基上增殖，必須依賴活體細(xì)胞來(lái)製造病毒所
需之蛋白質(zhì)、酵素等，因此為達(dá)到增殖病毒之目的，必須先培養(yǎng)細(xì)胞，而人工培
養(yǎng)細(xì)胞又可分成初代細(xì)胞培養(yǎng)以及株化細(xì)胞之繼代培養(yǎng)，前者所取之材料為動(dòng)物
內(nèi)臟、組織或胚胎，后者則為已癌化之細(xì)胞株，依病毒增殖之喜好選擇初代細(xì)胞
或株化細(xì)胞培養(yǎng)。
三、材料與設(shè)備
(一) 材料
1. 培養(yǎng)基（minimum essential medium; MEM）
2. 胎牛血清 (fetal calf serum; FCS)
3. 磷酸緩沖溶液（PBS; pH 7.2-7.4）
4. Vero 細(xì)胞株
5. 25 cm2 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 (culture flask)
6. Dulbecco's PBS
7. citosol 麻醉劑
8. RPMI-1640 細(xì)胞培養(yǎng)液
9. penicillin 及 streptomycin
10. Trypan blue 染劑
11. 24 孔平板培養(yǎng)皿
(二) 設(shè)備
1. 無(wú)菌操作臺(tái)
2. 倒立顯微鏡
3. 微量吸管(pipetman)
4. 塑膠吸管（1、5、10、20 ml）
5. 血球計(jì)算板
6. 真空幫浦
7. 二氧化碳培養(yǎng)箱