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本文標(biāo)題："外熒光顯微鏡計(jì)數(shù)被著色的細(xì)胞分析顯微鏡"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2018-9-17 23:11:51 本站主頁(yè)地址：http://m.vndmy.cn
直接外熒光過(guò)濾器技術(shù)
這種膜過(guò)濾技術(shù)被認(rèn)為是基本方法的改良。直接外熒光過(guò)濾器技術(shù)(di
rect epifluorescent filtertechnique，DEFT)將熒光染色和熒光顯微技
術(shù)結(jié)合，是一種快速的食品微生物檢測(cè)技術(shù)和方法。稀釋的食品樣品液通
過(guò)5 p．m的尼龍過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾，收集過(guò)濾液并用2 mI。去利通(Triton；
譯者注：非離子型表面活性劑的商品名)X一100和0．5 mL胰島素進(jìn)行處理
。這種試劑用來(lái)溶解肉體細(xì)胞和防止阻塞過(guò)濾器。培養(yǎng)之后，過(guò)濾液通過(guò)0
．6肛m孔徑的聚碳酸酯過(guò)濾膜過(guò)濾，隨后濾膜被11'f啶橙著色、干燥后，
使用外熒光顯微鏡計(jì)數(shù)被著色的細(xì)胞，顯微鏡下每個(gè)區(qū)域細(xì)胞的平均數(shù)相
加即得每克樣品的細(xì)胞數(shù)。20～30 min得到結(jié)果，應(yīng)用此方法測(cè)得肉和乳
制品中的微生物數(shù)量約為6 000 cfu／g。
直接外熒光過(guò)濾技術(shù)應(yīng)用于乳品中凹…，與APC法和DMC法所獲得的結(jié)
果類(lèi)似，在5×103～5×108 cfu／mI。。在大約10 min內(nèi)，這種方法能夠
檢出乳品種活性革蘭氏陰性菌和全部的革蘭氏陽(yáng)性菌no…。大約20 min內(nèi)
，可以計(jì)數(shù)熱處理乳及乳制品中的微生物，檢測(cè)下限細(xì)菌數(shù)少到5 700 cfu
／mI。[9 8。。通過(guò)6個(gè)實(shí)驗(yàn)室協(xié)作研究，對(duì)比了DEFT(直接外熒光過(guò)濾器
法)和APC(好氧平板計(jì)數(shù)法)，通常情況下兩者的相關(guān)系數(shù)在0．9以上。但
是DEFT(直接外熒光過(guò)濾器法)的重復(fù)性要比APC(好氧平板計(jì)數(shù)法)的重復(fù)性
差1．5倍，而實(shí)驗(yàn)的再現(xiàn)性卻僅是APC(好氧平板計(jì)數(shù)法)的3倍[9“。DEFT(
直接外熒光過(guò)濾器)法可以計(jì)數(shù)過(guò)濾后的固體食品
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