未來植物病毒檢測技術的發(fā)展
自 1980 年代起, ELISA 技術即為種苗業(yè)界接受度最高、應用最廣泛的檢測方法,使得相關耗材、儀器及藥品產(chǎn)業(yè)一直蓬勃發(fā)展;由于 ELISA 技術之關鍵在于病毒檢測用抗體的品質,因此也帶動了各國植物病毒檢測抗體及試劑相關產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。惟 ELISA 適用于大量樣品的檢測,為配合種苗培育現(xiàn)場少量樣品快速檢測的需求,近年來亦有廠商開發(fā)「免疫試紙條」,此類檢測套組具有可于常溫運送、操作簡便、反應時間短等優(yōu)點,且敏感度亦不差;然此類檢測套組僅可供現(xiàn)場人員參考,不適用于健康種苗繁殖前之親本病毒檢測。
而核酸檢測自 90 年代初,即有許多研究如雨后春筍般發(fā)展,早期以應用互補序列之核酸探針技術為主,此方法雖然較血清免疫技術敏感,但因使用放射線物質而有安全與環(huán)保顧慮,后來改以非放射物質標定。 PCR 技術自發(fā)明以來,不但提昇了植物病毒檢測敏感度,有效減少病毒漏檢的風險,亦使檢測技術多元化,因而相關產(chǎn)業(yè)的發(fā)展較 ELISA 更為快速;雖然 PCR 技術成本仍較偏高,且無法進行大量樣品的病毒檢測,不過,因其敏感度高,除了可考慮用于重要種源或組織培養(yǎng)之親本的病毒篩檢,未來朝可于單一反應檢測 2 種以上病毒的多目標型 RT-PCR ( multiplex RT-PCR )技術方向研發(fā),以節(jié)省成本