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滅菌前必須檢查鍋中水是否適量-培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)
滅菌過(guò)程
(1)加水:滅菌前必須檢查鍋中水是否適量,如果水沒(méi)有到標(biāo)
示線,加人適量蒸餾水。加水步驟非常重要,如果鍋中水太少而使
用滅菌鍋,會(huì)燒壞滅菌鍋,嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成事故。
(2)裝鍋:把需滅菌的器物放入鍋內(nèi),鍋中器物不要裝得太滿,
否則滅菌將不徹底。關(guān)嚴(yán)鍋蓋,按對(duì)角方式均勻擰緊螺旋,打開(kāi)排
氣閥。
(3)啟動(dòng):用電源的則啟動(dòng)開(kāi)關(guān)。熱源為蒸汽的則慢慢打開(kāi)蒸
汽口,應(yīng)避免蒸汽進(jìn)入過(guò)猛。
(4)關(guān)閉排氣閥:鍋內(nèi)水沸騰后,產(chǎn)生的蒸汽將鍋內(nèi)冷空氣驅(qū)
凈,當(dāng)溫度計(jì)指針指向100℃時(shí),鍋內(nèi)已充滿蒸汽,這時(shí)關(guān)閉排氣
閥o
(5)升壓、升溫:關(guān)閉排氣閥以后,鍋內(nèi)成為密閉系統(tǒng),蒸汽不
斷增多,鍋中壓力和溫度上升。當(dāng)壓力達(dá)到0.105MPa(此時(shí)溫度
為121℃)時(shí),滅菌開(kāi)始。維持壓力在0.105MPa共15~30min,以保
證滅菌徹底。除含糖培養(yǎng)基用0.056MPa(112℃)壓力滅菌外,一
般用0.105MPa壓力滅菌。
(6)滅菌停止:當(dāng)滅菌完成后,停止加熱,任其自然降壓,當(dāng)指
針回到零時(shí),打開(kāi)排氣閥。特別注意的是,排氣閥不能過(guò)早打開(kāi),
否則因壓力突然下降,溫度還沒(méi)有及時(shí)下降,培養(yǎng)基會(huì)沸騰,從而
有可能損失培養(yǎng)基,并玷污棉塞、器皿、滅菌鍋等。
(7)保存:培養(yǎng)基冷卻后,放入冰箱或陰涼處保存?zhèn)溆谩?/div>
濕熱滅菌除高壓蒸汽滅菌外,還可以在常壓下滅菌,即間歇滅
菌,該方法適用于某些易受高溫破壞培養(yǎng)基的滅菌。間歇滅菌一
般在100℃煮30。60min后冷卻,置于37℃培養(yǎng)24h,重復(fù)三次。
為確保無(wú)菌,37℃培養(yǎng)24h后,檢查是否已滅菌徹底。
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