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本文標題："細胞小培養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察"
新聞來源：未知 發(fā)布時間：2016-12-15 23:41:29 本站主頁地址：http://m.vndmy.cn
細胞小培養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察
一旦種植了原代細胞，細胞會處于一個高度營養(yǎng)的條件下，
貼附到底物上，但是，絕大多數(shù)細胞會死亡或發(fā)生分化。培養(yǎng)2～3
d后，增殖性細胞會離開組織培養(yǎng)皿底部，聚集成神經(jīng)球樣的細胞
團，通常培養(yǎng)48h可以觀察到。這些聚集的細胞團不應被誤認為原
代神經(jīng)球。聚集細胞團塊的數(shù)量直接與培養(yǎng)基中細胞碎片和死細胞
數(shù)量有關。通常情況下，這些假神經(jīng)球是很大的，但是它們是由小
的、變黑的、形狀不規(guī)則的細胞組成的。
pH誘導法
將相對接合型的兩種純系培養(yǎng)液各1 mL混合于小培養(yǎng)皿中，然
后分別向混合培養(yǎng)液中加入新鮮配制的一定pH梯度的培養(yǎng)液2 mL。
在20～25℃下培養(yǎng)。將小培養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察。
測定培養(yǎng)溫度，準確記錄出現(xiàn)接合生殖相的pH值、接合生殖率
最高時的pH值、接合生殖相不再出現(xiàn)時的pH值，尋找不同pH值下接
合生殖率的變化規(guī)律，分析變化原因。通過計算接合生殖率找出誘
導接合生殖的最適pH值。
每個組合設3個重復，需同學們協(xié)作完成。
溫度誘導法
先通過智能恒溫培養(yǎng)箱找出致死大草履蟲的最高溫度、最低溫
度，以確定大草履蟲存活的溫度范圍。
將相對接合型的兩種純系培養(yǎng)液和新鮮培養(yǎng)液各l mL混合于小
培養(yǎng)皿中，然后分別放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在大草履蟲存活的溫
度范圍內(nèi)，以1℃為梯度改變培養(yǎng)溫度。2 h后，每隔10 min將小培
養(yǎng)皿直接置于體視顯微鏡下觀察，以判斷是否出現(xiàn)接合生殖相。每
個組合設3個重復。
測定培養(yǎng)液的pH值，準確記錄開始出現(xiàn)接合生殖相的溫度、接
合生殖率最高時的溫度、接合生殖相不再出現(xiàn)時的溫度，尋找不同
溫度下接合生殖率的變化規(guī)律，分析變化原因。依據(jù)接合生殖率找
出誘導接合生殖的最適溫度。
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