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本文標(biāo)題："制備高品質(zhì)的顯微鏡載玻片必須預(yù)先清洗"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2016-7-17 4:20:57 本站主頁(yè)地址：http://m.vndmy.cn
制備高品質(zhì)的顯微鏡載玻片必須預(yù)先清洗
制備
在制備巾期染色體鋪片之前，高品質(zhì)的顯微鏡載玻片必須
預(yù)先清洗:用乙醉/乙醚(100:1)液沖洗和用不起毛的布或薄
鏡紙擦干。甲醉必須是新的(為鋪片須購(gòu)買(mǎi)小瓶裝的和只用新
瓶)。用在進(jìn)行秋水仙胺處理同步化和用KCI低滲處理之后，
從水浴中移去lOml的細(xì)胞培養(yǎng)物。按比例加人I.Oml新的甲
醉和乙酸(3:1)固定劑到KCI細(xì)胞懸浮液中，然后倒71輕輕
地混合這些物質(zhì)。
離心之后(200g, 8分鐘)，留下0.3m1，移去其余上清
液。用手指或低速振蕩使管中的物質(zhì)輕輕地重新懸浮。在輕輕
振蕩的同時(shí)逐滴加人固定劑，接下來(lái)的3ml固定劑征5滴征5
滴地加人。最后迅速加人4m1固定劑，同時(shí)倒置混合.總數(shù)為
lOml的固定劑。在最后固定的水相中，紅細(xì)胞應(yīng)當(dāng)溶解，證
據(jù)就是細(xì)胞的混濁液變清。在室溫培養(yǎng)溶液20分鐘，然后按
通常那樣離心。
離心之后，留下0.3m1上清液，移去其余的上清液，輕
輕振蕩使沉淀物重新懸浮，加人lOml新的固定劑，同時(shí)振蕩，
頭Sml按每次0.5ml的量加人，然后在室溫繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞10
分鐘。該洗滌過(guò)程再重復(fù)兩次以上。在最后一次洗滌之后，重
新懸浮細(xì)胞沉淀，放人一個(gè)離心試骨中。如果在試竹中制備的
細(xì)胞含有黑色凝塊，其樣品必須棄掉。白色凝塊可以用巴氏吸
管吸取。
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