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本文標(biāo)題:"激光共焦熒光顯微鏡測試-熒光技術(shù)的應(yīng)用"

新聞來源:未知 發(fā)布時間:2016-6-27 17:23:41 本站主頁地址:http://m.vndmy.cn

激光共焦熒光顯微鏡測試-熒光技術(shù)的應(yīng)用

熒光漂白

  光漂白(也稱為褪色)是在光照條件下使其發(fā)生化學(xué)反應(yīng)或結(jié)構(gòu)改變
,從而失去發(fā)熒光的特性,就是所謂的漂白。它常用于生物體內(nèi)擴(kuò)散速
率常數(shù)的測定。由單重激發(fā)態(tài)躍遷到三重激發(fā)態(tài),熒光團(tuán)會和另外的分
子反應(yīng)產(chǎn)生不可逆的共價修正。簡而言之,熒光漂白是熒光團(tuán)的光化學(xué)
破壞。在熒光漂白之前,某一特定熒光團(tuán)的激發(fā)和輻射周期的平均數(shù)值
取決于分子結(jié)構(gòu)及所處環(huán)境。一些熒光團(tuán)漂白很快,只需釋放一些光子
,然而對于其他的,在漂白之前需要經(jīng)歷成千上萬次周期。

  每一個熒光團(tuán)都有不同的光漂白特性。對于激光共焦熒光顯微鏡
講,光漂白是最大的問題,因此實(shí)際測試中需要考慮避免或減輕光漂白
程度。因此在激光共焦熒光顯微鏡測試中,需要選取合適的染料,該染
料可以在正常激光強(qiáng)度照射下最大程度減輕光漂白程度。當(dāng)具有光漂白
的染料用于測試中,以下三種方法可以降低光漂白程度:盡可能用低的
激光強(qiáng)度;盡可能降低照射的時間(實(shí)際測試中,盡快完成一次測試);
采用自由基清除體。

  多數(shù)的光漂白可以歸結(jié)于自由基。采用自由基清除體則能降低光漂
白的速率。常用自由基清除體包括五倍子酸丙烷、對苯二胺以及三乙烯
二胺(DABCO)。

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