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胚胎學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物等教學(xué)用
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滅活細(xì)菌基因的技術(shù)已經(jīng)闡述。將其用于動物細(xì)胞甚至整個動物也是可能的,這是一個
費錢、費時的任務(wù)。但是,現(xiàn)在已經(jīng)生產(chǎn)出大量轉(zhuǎn)基因動物,其體內(nèi)一個或一個以上的基因已
被滅活。這些動物稱為轉(zhuǎn)基因敲除,對在整體動物中確定個別基因的目的特別有用。另外,也
可以用額外基因生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物。
制造轉(zhuǎn)基因動物需要掌握胚胎學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)和動物飼養(yǎng)技術(shù)。在轉(zhuǎn)基因敲除
和轉(zhuǎn)基因補充(表達外源添加基因)動物中, DNA被注人受精卵(一般為小鼠受精卵)。將哺乳
動物的基因敲除也就是通過同源重組去除感興趣的靶基因,這意味著外源DNA可以被整合
到小鼠基因組的同一位點。外源基因可通過微注射進人剛受精的胚胎。目前更為廣泛使用的
一種技術(shù)是運用全能胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞),這是一些未分化胚胎細(xì)胞,能夠分化成為各類組
織細(xì)胞。用感興趣的基因轉(zhuǎn)染這些細(xì)胞,然后把細(xì)胞通過顯微操作注人發(fā)育中的胚胎。由此
發(fā)育而成的小鼠是一種嵌合體,并非所有細(xì)胞都包含轉(zhuǎn)移的基因。但是,通過合適的繁殖過
程,能夠產(chǎn)生缺乏靶基因的純合子小鼠,如果這些動物能夠存活,將用于實驗。也可能敲除超
過一種基因,許多雙敲除實驗已成功進行。
目前已成功制造大量轉(zhuǎn)基因敲除小鼠,使研究個別荃因?qū)Σ≡w的應(yīng)答功能成為可能。
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