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動物石蠟切片制作觀察
顯微鏡-學(xué)生生物實(shí)驗(yàn)
動物石蠟切片
動物石蠟切片系將動物材料切塊成適當(dāng)?shù)拇笮,滲入石蠟以支持組織,然后用轉(zhuǎn)動式切片機(jī)
(Rotary microtome)以切片鋼刀或拋棄式切片刀切成適當(dāng)厚度的切片。
【材料】
(1) 材料準(zhǔn)備:針、單面刀片、臺木、壓舌板、載玻片、紗布、無塵紙、40°C溫板、40°C恒溫箱、
圭筆、黑紙、切片刀、載玻片、標(biāo)簽及鉛筆
【步驟】
(1) 玻片前處理:
→ 載玻片先浸泡于70%或90% alcohol中備用
→ 使用時(shí)以紗布擦拭置于約40°C溫板上烤干
→ 涂上蛋白膠再置于約40°C溫板上略烤干備用
(2) 轉(zhuǎn)動式切片機(jī)切片:
→ 將貼附材料蠟塊的小木塊置于樣品座上
→ 將切片刀片或切片鋼刀架于刀座上(一般調(diào)整刀片角度約為4-6°)
→ 依轉(zhuǎn)動式切片機(jī)使用方式切片成8-10 μm厚度之薄片
(3) 張貼切片:
→ 于黑紙上選取切好的連續(xù)蠟帶
→ 以刀片切割成比蓋玻片長度稍短的連續(xù)蠟帶
→ 將切割好的連續(xù)蠟帶置于組織漂浮槽(Tissue floating bath)中,待展開后以涂有蛋白膠的載玻片
貼附之,再移到溫板上待略干
→ 再放入40-45°C之烘箱內(nèi)烘干約一至二天
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