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倒立
顯微鏡下觀察分析細(xì)胞或生物體的
微觀特征
顯微注射是常見的基因轉(zhuǎn)殖方法之一,需在倒立顯微鏡下操作,將需
注射的外來(lái)基因放入針管中,藉由顯微操作系統(tǒng)(micromanipulator)來(lái)控
制握針器(needle holder)以移動(dòng)針,將外來(lái)基因注射進(jìn)入生物體內(nèi)。顯微
注射成功率高,是做基因轉(zhuǎn)殖蟲的一種很好的方法。但由于一次只能注射
一個(gè)細(xì)胞或一個(gè)生物體,因此無(wú)法大量制造基因轉(zhuǎn)殖生物,生產(chǎn)效率低。
本實(shí)驗(yàn)將 GFP 連接我們所需的基因注入 C. elegan 的卵巢中,使其所產(chǎn)的卵
中帶有 GFP 及所需的基因,其將表現(xiàn)在子代,而 C. elegan 產(chǎn)卵量多且速度
快,因此可以克服上述生產(chǎn)效率低的困難。以下為實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/div>
一、將基因 F22B79 和熒光基因 GFP 利用顯微注射轉(zhuǎn)殖到線蟲體內(nèi),以做
為標(biāo)識(shí),并觀察其發(fā)光位置是否和基因表現(xiàn)位置相同。
二、將基因 Myo3 和 GFP 利用顯微注射轉(zhuǎn)殖到線蟲體內(nèi),以做為標(biāo)識(shí),并
觀察其發(fā)光位置是否和基因表現(xiàn)位置相同。
三、利用 GFP 及 sbp-1 來(lái)追蹤線蟲的脂肪含量,并進(jìn)一步測(cè)量以及量化其
發(fā)光程度,觀察是否可用來(lái)推測(cè)線蟲身上的脂肪含量多寡
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