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細胞培養(yǎng)系統(tǒng)組裝
整個細胞培養(yǎng)系統(tǒng)包含許多設備,因此組裝過程將影響整個實驗的成
功與否,組裝方法:
1. 將生物反應器、ENH 電磁式定量泵浦、血清瓶和矽膠管移入無菌操
作臺內(nèi),鎖緊 ENH 電磁式定量泵浦本體和泵浦頭。
2. 用矽膠管連接生物反應器與 ENH 電磁式定量泵浦頭,再以 ENH 電
磁式定量泵浦將 95%乙醇打入并循環(huán)至整個生物反應器 30 分鐘,
已徹底滅除矽膠管內(nèi)細菌,之后使用磷酸緩衝溶液循環(huán) 30 分鐘,
沖洗系統(tǒng)內(nèi)殘馀乙醇與雜質,完成后拆開生物反應器,關上出口端
針閥。
3. 將 24 小時前種植的細胞玻片固定在細胞固定架上,由培養(yǎng)室本體
下方放入,鎖上培養(yǎng)室下蓋,放入培養(yǎng)室內(nèi)槽后將細胞培養(yǎng)液加滿
鎖上培養(yǎng)室上蓋。
4. 打開出口端針閥,以最小衝程頻率循環(huán)細胞培養(yǎng)液 10 分鐘,用以
排出生反應器系統(tǒng)中之氣泡。到此整個生物反應器與壓力驅動完全
密封。
5. 將生物反應器系統(tǒng)與壓力驅動移出無菌操作臺,生物反應器置于顯
微鏡溫控臺上,含細胞培養(yǎng)液之血清瓶放入由顯微培養(yǎng)箱與恒溫水
槽提供的環(huán)境內(nèi),生物培養(yǎng)系統(tǒng)組裝完成
細胞影像處理
利用
顯微鏡自動影像擷取系統(tǒng)作連續(xù)取像,參考 Wu 找初始輪廓的步驟
找出包圍細胞影像之初始輪廓,最佳二值化影像后將初始細胞影像輪
廓外之背景去除,以減少運算量,再利用細胞輪廓衍生成面積變化與遷移
速率,得到細胞受不同壓力刺激下物理反應
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