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本文標(biāo)題："請問HA-p53所指的HA是什么縮寫？"

請問HA-p53所指的HA是什么縮寫？
若前方加上pcDNA 是否變?yōu)関ector？
拜託了解分子生物的知識達(dá)人解答！
如果能連同實驗步驟.方法與運用詳加說明更佳，
謝謝！

HA是vector上提供的HA-tag
是vector上的一段序列
通常在vector的MCS(multiple cloning site)后面,有些tag也在前面...
基因接進(jìn)MCS中,如果基因表現(xiàn)之后,
會和基因產(chǎn)生的protein形成fusion protein...
就是說基因產(chǎn)生的protein后面會多一段HA序列...
加上HA-tag的目的,
是為了在protein做一個標(biāo)記...
作為日后實驗時...偵測或是純化protein時用的marker...
其他功能類似的tag還有myc,6Xhis,V5 epitope,GST,GFP,RFP,YFP,lacz,bioluminescence ...等

HA-tag是一段九個胺基酸的序列,胺基酸序列是(YPYDVPDYA)
可以用HA-tag的antibody去偵測或是純化蛋白...
所以你的plasmid,pCDNA-HA-P53
所產(chǎn)生的protein是和HA-tag形成fusion protein的p53protein

接上這些tag的目的...當(dāng)然是為了偵測或純化protein用的
就像有些protein我們會construct在GFP的vector上...
產(chǎn)生GFP的fusion protein...
之后我們只要在螢光顯微鏡下觀察,就能知道基因的表現(xiàn)情形...
或是做動物實驗時,可用于追蹤細(xì)胞...

或是可用于大量純化protein...
例如接上GST或6XHIS...
GST是Glutathione S-transferase ,會和Glutathione結(jié)合...
6XHIS是6個histidine,可和Ni(鎳)結(jié)合...
Glutathione或Ni接上bead后,可用于純化這種protein...

你的p53protein 形成的HA-tag fusion protein
當(dāng)你做細(xì)胞染色時,可用HA-tag antibody來偵測p53的表現(xiàn)情形...
或是如果要做protein-protein interaction 方面的實驗,如免疫沉淀...
因為當(dāng)使用p53 antibody時,antibody接上p53 protein 時,
p53 protein有可能會發(fā)生結(jié)構(gòu)改變,
或是和其他protein interaction的位置被antibody擋住...
可能使protein失去和其他protein interaction的能力
所以或做一個HA-tag fusion protein...
再用HA-tag的antibody去認(rèn)fusion protein的HA-tag...
這樣就不會因為接上antibody發(fā)生結(jié)構(gòu)改變,
或是和其他protein interaction的位置被antibody擋住的情形發(fā)生...